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PCR儀試驗的假陽(陰)性擴增現象探究

發布時間: 2021-11-22  點擊次數: 216次
   PCR儀已成為分子生物學、醫學、食品工業、司法科學、生物技術、環境科學、微生物學、臨床診斷、流行病學、遺傳學、基因芯片、基因檢測、基因克隆、基因表達等領域廣泛應用的一種儀器。在進行試驗時若出現的假陽(陰)性擴增和假陰性擴增現象該怎么去分析?
  1.假陽性擴增
  這是擴增系統受到污染的表現,應通過檢查排除污染源。首先考慮是否為試劑污染,可將試劑分裝好直接置于PCR儀中擴增進行判斷。其次要考慮是否為實驗室污染,可更換所用的移液器、吸咀管(離心管)等,將試驗中的關鍵步驟轉移到一個新的環境中,判斷是否為實驗室污染。如果是則需要對整個實驗室及實驗器材徹底清洗處理,保持良好的通風、清潔等。此外,還要考慮是否為采樣污染,一般表現為一批結果陽性率很高,一批結果陽性率又下降很多,如此反復。解決方法為盡量使用一次試管及吸咀取樣。
  2.假陰性擴增
  首先要考慮是否為儀器故障,儀器應正常運轉,尤其要注意加熱溫度及各管間的差異是否符合實驗要求,是否出現誤差等。其次要考慮是否為試劑失效或無效引起,使用有效的試劑。
  PCR儀是利用DNA聚合酶用于擴增特定的DNA片段,對特定基因做體外大量合成,可以將一段基因復制為原來的百億至千億倍。利用安捷倫特有的酶融合技術,梯度PCR儀可為您獲得更快、更好結果;其可靈活配備96和384孔加熱模塊并具優異的梯度功能,用于加速實驗方案開發。
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